實驗 蛋白質的沉淀反應與顏色反應
一、實驗目的
掌握鑒定蛋白質的原理和方法。熟悉蛋白質的沉淀反應,進一步熟悉蛋白質的有關反應。
二、實驗原理
蛋白質分子中某種或某些集團可與顯色劑作用,產生顏色。不同的蛋白質由于所含的氨基酸不完全相同,顏色反應亦不完全相同。顏色反應不是蛋白質的專一反應,一些非蛋白物質也可產生同樣的顏色反應,因此不能根據顏色反應的結果來決定被測物是否為蛋白質。另外,顏色反應也可作為一些常用蛋白質定量測定的依據。蛋白質是親水性膠體,在溶液中的穩定性與質點大小、電荷、水化作用有關,但其穩定性是有條件的,相對的。如果條件發生了變化,破壞了蛋白質的穩定性,蛋白質就會從溶液中沉淀出來。
三、實驗儀器
1、吸管 2、滴管 3、試管 4、電爐 5、pH試紙 6、水浴鍋7、移液管
四、實驗試劑
1、卵清蛋白液:雞蛋清用蒸餾水稀釋10-20倍,3-4層紗布過濾,濾液放在冰箱里冷藏備用。
2、 0.5%苯酚:1g苯酚加蒸餾水稀釋至200ml。
3、Millon’s試劑:40g汞溶于60ml濃硝酸(水浴加溫助溶)溶解后,冷卻,加二倍體積的蒸餾水,混勻,取上清夜備用。此試劑可長期保存。
4、尿素晶體
5、1%CuSO:1g CuSO晶體溶于蒸餾水,稀釋至100ml 44
6、10%NaOH:10g NaOH溶于蒸餾水,稀釋至100ml
7、濃硝酸
8、0.1%茚三酮溶液:0.1g茚三酮溶于95%的乙醇并稀釋至100ml.
9、 冰醋酸
10、濃硫酸
11、飽和硫酸銨溶液:100ml蒸餾水中加硫酸銨至飽和。
12、硫酸銨晶體:用研缽研成碎末。
13、95%乙醇。
14、醋酸鉛溶液:1g醋酸鉛溶于蒸餾水并稀釋至100ml
15、氯化鈉晶體
16、10%三氯乙酸溶液:10g三氯乙酸溶于蒸餾水中并稀釋至100ml
17、飽和苦味酸溶液:100ml蒸餾水中加苦味酸至飽和。 18、1%醋酸溶液。
…… …… 余下全文